Fluid Helios质谱流式操作规程

1.        检查氩气含量、排气、PSI以及状态面板指示灯是否有异常，空调制冷是否正常。

2.        打开Helios软件打开Heater进行预热，以减少点火时间。

3.        清洗Nebulizer，使用对应注射器抽洗Nebulizer的外管和内管2-3次(不可吹打)，并正确安装Nebulizer和检查Nebulizer的通气和进样是否正常。

4.        当Heater加热至130℃并使PSI处于关闭状态，点击Start进行点火，进行启动离子化系统，直至点火成功(通常需要15分钟，期间可准备处理样本)。

5.        在PSI中加载4ml 超纯水，使用tune界面进行检查背景，如有污染信号，可使用超纯水或wash solution上样冲洗并再次检查冲洗，直至背景干净。

6.        在PSI中加载1mL Tuning Solution，并使用Auto-tuning，并选取对应Protocol进行自动校准(确保仪器已经点火15分钟以上，以免温度变化造成信号强度变化)，并等待Tuning报告，查看是否有异常。

7.        在PSI中加载500μl EQ Beads，使用Acquire界面进行跑样测试120秒，并检查结果报告是否达到要求。

8.        在PSI中加载3mL CAS，并进行上样跑15分钟，以让仪器适应CAS buffer，稳定仪器状态。

9.        在PSI中加载处理好并过滤的样本(细胞浓度应适宜)并用含10% EQ Beads的水溶液将总体积调整至合适体积(根据不同细胞数量调整)。起始细胞浓度应在

1-3 * 10^⁶ cells/ml为宜。并使用Acquisition 界面设置好protocol(标记的通道和对应蛋白名称，以及细胞大小参数，污染质控参数，保存文件格式地址等)，并进行preview 观察RainPlot和Plotviewer等待细胞信号稳定出现，再进行record，应注意将样本检测的速率控制在500 events/s。

10.    一个样品检测完毕后，需向PSI中加载4ml CAS solution进行清洗，耐心等待5-15分钟，点击preview<